Amyloid beta inducerad klyvning av NG2 medierad via LRP-1 receptorn
NG2 proteoglykanLow density lipoprotein receptor related protein 1 (LRP-1)PericyterAmyloid betaAlzheimer's sjukdom
Bakgrund: Deposition av fibrillär amyloid beta 1-42 (A?) i hjärnan är ett välkänt kännetecken för den neurodegenerativa sjukdomen Alzheimer?s (AD). Dessa ansamlingar påverkar pericyter, en celltyp involverad i blodkärlsfunktion och upprätthållande av blodhjärnbarriären (BBB). Pericyter uttrycker både receptorn low density lipoprotein receptor related protein 1 (LRP-1) till vilken A?1-42 binder, och proteoglykanet NG2. NG2 har stor betydelse för pericyters samspel med endotelceller och i sin lösliga form (sNG2) främjar den angiogenes. Tidigare studier har visat att mängden NG2 som klyvs från pericyter förändras när de stimuleras med A?1-42.
Syfte: Att undersöka om A?1-42 påverkar NG2 klyvning via LRP-1
Metod: Human brain vascular pericytes (HBVP) stimulerades med monomera, oligomera och fibrillära A?1-42 preparationer. Uttrycket av LRP-1 tystades med small interfering (si) LRP-1 och knockdown efficiency analyserades med Western Blot (WB). Även A?1-42 preparationer undersöktes med WB. Cellviabilitet mättes med laktatdehydrogenas (LDH) test och proteininnehåll med Bradford analys. Slutligen mättes mängden sNG2 i pericytmedium med hjälp av enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA) baserad på electrochemiluminescence (Mesoscale).
Resultat: Preparationerna med monomer och oligomer A?1-42 ökade NG2 klyvning. Denna A?1-42 inducerade ökning försvann när cellernas LRP-1 tystats. A?1-42 fibrillpreparationerna inhiberade däremot NG2 klyvningen oavsett närvaro av LRP-1. A?1-42 monomerpreparationer inducerade celldöd hos HBVP med LRP-1 men inte hos de HBVP där LRP-1 tystats, och cellviabiliteten hos HBVP ökade hos celler som stimulerats med A?1-42 fibrillpreparation och där LRP-1 tystats.
Konklusion: Resultaten visar att A?1-42 monomer och oligomer påverkar NG2 klyvning via LRP-1. Däremot verkar A?1-42 fibrill istället påverka NG2 klyvning via en annan signalväg. Studien belyser hur A?1-42 kan påverka pericyter, vilket kan föreligga vaskulära förändringar kopplade till AD patologi.